Лабораторная диагностика полиомиелита

Полиовирусы – это энтеровирусы серотипов 1, 2 или 3, которые поражают человеческий организм. Инкубационный период, как правило, составляет 7–10 дней (с колебанием от 4 до 35 дней). У большинства инфицированных полиовирусом лиц никаких симптомов не наблюдается, хотя они могут продолжать выделять вирус с каловыми массами и в течение более короткого времени – со слюной. У приблизительно одной четверти инфицированных возникают слабо выраженные, транзиторные симптомы, включая лихорадку, головную боль, общее недомогание, тошноту, рвоту и явления ангины. У некоторых индивидуумов (около 4%) развивается самокупирующееся заболевание с признаками раздражения мозговых оболочек (ригидность затылочных мышц, сильная головная боль). Редким исходом бывает паралитический полиомиелит, который наблюдается, когда полиовирус проникает в центральную нервную систему и размножается в клетках переднего рога (двигательных нейронах) спинного мозга или ствола головного мозга. У детей в возрасте < 5 лет эта патология наблюдается в < 1% случаев полиовирусной инфекции.

РАССЛЕДОВАНИЕ СЛУЧАЕВ ЗАБОЛЕВАНИЯ.

Все подозрительные на заболевание случаи должны быть расследованы в пределах 48 часов с момента получения извещения; в идеальном случае все пробы стула должны быть взяты не позднее 14-го дня с начала возникновения паралича. Формы расследования следует заполнять по каждому случаю заболевания с целью получения основных демографических данных и подробной информации о клинике заболевания, включая результаты неврологического обследования, прививочный анамнез и информацию о состоянии здоровья и факторах риска. С целью выявления возможного источника экспозиции важно собрать сведения о прошлых поездках за пределы постоянного места жительства или о визитерах из других территорий в течение 35 дней от начала появления паралича. Следует установить наличие контакта с каким-либо лицом с ОВП в этот 35-дневный период.

В отношении каждого случая ОВП необходимо как можно скорее после начала возникновения паралича взять адекватные пробы стула для лабораторного подтверждения полиомиелита. Последующее наблюдение в течение 60 дней после расследования должно быть полностью завершено в отношении всех случаев ОВП, от которых не были получены адекватные пробы стула для оценки остаточного паралича.

ВЗЯТИЕ ПРОБ ДИАГНОСТИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА У ЗАБОЛЕВШИХ.

Необходимо взятие у больного с ОВП двух проб стула, в идеальном варианте в пределах 14 дней с начала возникновения паралича (в крайнем случае, в пределах 60 дней), и эти пробы стула должны быть получены с интервалом не менее 24 часов.

Объем пробы стула: 8–10 г, т.е. размером примерно в два ногтя большого пальца кисти взрослого человека. Это количество позволяет провести двойное тестирование, если это потребуется.

Время взятия проб: Взятие проб стула должно осуществляться в пределах 14 дней с начала возникновения паралича, когда вероятность выявления полиовируса наибольшая. Однако сбор проб следует осуществлять вплоть до 60-го дня с момента появления паралича, так как в пределах этого срока возможно выявление полиовируса. Ввиду того, что выделение полиовируса может происходить с перерывами, для повышения шанса его выявления необходимо брать две пробы с интервалом не менее 24 часов. Пробы стула у больных, начало паралича у которых приходится на период по истечении 60 дней, не собирают.

Хранение и обращение с пробами диагностического материала: Пробы стула должны быть помещены в соответствующие контейнеры с плотной крышкой во избежание утечки или возможного высыхания содержимого. Контейнеры с пробами должны быть незамедлительно помещены в предназначенный для этого термоконтейнер с температурой в пределах 4–8°C между замороженными хладоэлементами. Пробы стула должны поступить в аккредитованную ВОЗ лабораторию в пределах 72 часов с момента их взятия. Если такой возможности нет, пробы необходимо заморозить при температуре -20°C и затем переслать в замороженном виде, желательно с сухим льдом или с хладоэлементами, которые предварительно также должны быть заморожены при -20°C. Этот процесс содержания проб в охлажденном или замороженном виде вплоть до доставки в лабораторию носит название «обратной холодовой цепи».

Документирование: Контейнеры с пробами должны поступать в лабораторию вместе с заполненной формой лабораторного исследования. Формы должны быть заполнены точно и разборчиво; приведенная в них информация будет использована для установления связи между данными формы расследования случая ОВП и результатами лабораторной диагностики.

ВЗЯТИЕ ПРОБ ДИАГНОСТИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА У КОНТАКТОВ (ВЗЯТИЕ ПРОБ У КОНТАКТНЫХ ЛИЦ)

Если нет возможности взять две пробы стула у больного с ОВП в пределах 14 дней с начала появления паралича, или если пробы стула поступают в аккредитованную ВОЗ лабораторию в плохом состоянии, необходимо взять по одной пробе стула от трех тесных контактов, желательно в возрасте < 5 лет. Пробы диагностического материала следует взять у близких членов семьи или контактных лиц из числа домочадцев, а если это невозможно, то у соседей или товарищей по детским играм. Процедура взятия и транспортировки этих проб такая же, как и при взятии проб у больного с ОВП.

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА

Лабораторное тестирование проб, полученных от больных с ОВП, является важным элементом эпиднадзора за ОВП, предоставляющим необходимую информацию для подтверждения случаев полиомиелита и изучения нуклеотидной последовательности генома для обоснования мер по ликвидации полиомиелита.

В основе лабораторного подтверждения лежит изоляция полиовируса с использованием монослойной клеточной культуры тканей (RD и L20B). В процессе тестирования на полиовирус возможна изоляция неполиомиелитного энтеровируса (НПЭВ), и такой результат регистрируется отдельно.

Внутритиповая дифференциация осуществляется методом постановки обратно-транскриптазной полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР) с целью идентификации ДПВ, ВРПВ или штамма Сэбина, а также серотипа (1, 2, 3).